人胰腺癌吉西他滨耐药细胞系的建立及耐药特性的检测

目的为揭示吉西他滨在胰腺癌中引起耐药的机制,建立了人胰腺癌吉西他滨耐药细胞系并对其细胞生物学特性进行了研究。方法逐步增加培养基中吉西他滨的浓度,在人胰腺癌细胞系SW1990中建立了对吉西他滨耐药的细胞系SW1990-GEM。采用四氮唑蓝(MTT)法和集落形成实验,计算SW1990和SW1990-GEM的半数抑制浓度(IC50)和耐药系数(RI)。比较SW1990和SW1990-GEM的生长曲线并计算出两细胞系的倍增时间。采用MTT法检测SW1990-GEM对几种常用抗肿瘤药物的交叉耐药谱。结果SW1990和SW1990-GEM的IC50分别为(0.428±0.069)μmol/L和(230.53±13.12)μmol/L,RI为537.45(P<0.001)。根据生长曲线计算出SW1990和SW1990-GEM的倍增时间为22.8小时和35.8小时。交叉耐药实验表明,SW1990-GEM对5-FU、表柔比星、丝裂霉素、甲氨蝶呤、紫杉醇、泰素帝、长春新碱和依托泊苷产生交叉耐药,对顺铂、阿糖胞苷无交叉耐药。结论成功建立了人胰腺癌吉西他滨耐药细胞系SW1990-GEM,耐药性能明显、稳定。SW1990-GEM对5-FU、表柔比星、丝裂霉素、甲氨蝶呤、紫杉醇、泰素帝、长春新碱和依托泊苷产生交叉耐药,对顺铂、阿糖胞苷无交叉耐药。     

arresten cDNA在人胃癌细胞SGC-7901中的表达及活性鉴定

目的：构建arresten cDNA的分泌型真核表达载体，将其转染人胃癌SGC-7901细胞，探讨arresten体外抑制血管内皮细胞生长的活性。方法：利用PCR法将小鼠Igκ链信号序列的60个碱基拼接至arresten cDNA的氨基端，并克隆入真核表达载体pcDNA3．1( )，然后以脂质体法将重组pcDNA3．1( )-arresten转染SGC-7901细胞，Western印迹检测arresten的分泌表达，最后，提取SGC-7901细胞培养上清，采用内皮细胞增殖抑制试验鉴定上清中arresten活性。结果：成功构建了arresten cDNA的分泌型真核表达载体，获得可表达arresten的SGC-7901细胞系，真核表达的arresten具有抑制血管内皮细胞增殖的活性。结论：arresten是一种有效的血管生成抑制剂，其cDNA的真核表达载体的成功构建为针对人类胃癌的arresten抗血管基因治疗研究奠定基础。     

蛋白质组学在肿瘤标志物筛选和筛查中应用与评价

据世界卫生组织(WHO)估计，2004年全球癌症新发病例约1000万，死亡620万，现患癌症病例2200万。预计2020年新发病例将达到1500万，死亡1000万，患病病例为3000万。由我国卫生部制定的“中国癌症预防与控制规划纲要(2004～2010)”中指出：20世纪70年代以来，我国癌症发病及死亡率一直呈上升趋势，至90年代的20年间癌症死亡率上升29．42％，     

儿童高危神经母细胞瘤~(131)I-MIBG巩固治疗的近期疗效及毒副反应观察

目的观察~(131)I标记间碘苄胍(~(131)I-MIBG)在儿童高危神经母细胞瘤(HR-NB)巩固治疗中的近期疗效及毒副作用。方法选择2014年1月—2018年2月在北京儿童医院血液肿瘤中心确诊为HR-NB,且巩固治疗前MIBG显像阳性予以~(131)I-MIBG治疗的34例患儿,回顾性分析其初诊时、~(131)I-MIBG治疗前后肿瘤标记物、骨髓细胞学检查、骨髓微小残留病灶及原发瘤灶大小等的变化,观察~(131)I-MIBG治疗后骨髓毒性、肝肾功能及甲状腺功能等毒副作用。结果 34例患儿经过化疗、手术、自体造血干细胞移植或局部放射治疗后,在~(131)I-MIBG巩固治疗前评估为可疑肿瘤进展者15例。接受~(131)I-MIBG治疗的中位次数为2(1-6)次,单次治疗剂量为90-200mCi(3330～7400MBq)。~(131)I-MIBG治疗后有4/6例患儿LDH降至正常,4/7例NSE有下降,5/10例尿VMA恢复正常,9/10例骨髓MRD转为阴性。治疗后仍有肿瘤进展者12例。中位随访21个月,预计经~(131)I-MIBG治疗患儿3年总生存率(OS)为69.9%,明显高于同期212例未经~(131)I-MIBG治疗的患儿(P <0.05),预计3年无事件生存率(EFS)为50.4%,相比差异无显著性(P>0.05)。所有患儿均出现骨髓抑制,中位持续时间4 (1～16)个月,以3度血小板减少症为著,无肝肾及甲状腺功能损害。结论 ~(131)I-MIBG是儿童HR-NB有效的巩固治疗手段,其毒副反应以骨髓抑制为主,尤以重度血小板减低为著,无明显肝肾功能损害。     

间充质干细胞治疗小鼠放射性肺损伤的病理学研究

目的 观察骨实质间充质干细胞及小鼠胚胎背主动脉(dorsal aorta,DA)区间充质干细胞对小鼠肺损伤的治疗作用。方法 将C57BL/6小鼠分为4组:正常对照组、肺照射组、骨片来源MSCs治疗组和胚胎背主动脉区来源MSCs治疗组。9个月后观察肺组织结构的病理变化。结果 小鼠肺纤维化及肺泡炎评分,正常组评0.17分、肺照射组评2分、胚胎背主动脉区MSCs治疗组评1分、骨片MSCs治疗组评1.38分,在骨片来源MSCs治疗组及胚胎背主动脉区来源MSCs治疗组均较肺照射组轻,由于例数少,未做统计分析。结论 无论是骨片来源还是胚胎背主动脉来源的MSCs,均有减轻放射性肺损伤的作用。